如何操作可见分光光度计 ?

可见分光光度计是实验室中一种常见且重要的分析仪器，广泛应用于教学研究、环境监测、食品检验、药品分析、工业生产控制等多个领域。其基本原理是利用物质对单色光的吸收特性，进行定性或定量分析。正确、规范地操作仪器是获得可信数据的基础。本文将围绕仪器的操作流程，阐述如何保障测试的质量精度，满足不同行业的应用需求。

一、 操作前的准备工作：

任何精密的测量都始于充分的准备。在开机前，以下几个步骤至关重要：

环境确认： 确保仪器放置在稳固、无振动的工作台上，避免阳光直射和强气流。环境温度与湿度应符合仪器工作要求，这是保证光学系统稳定，减少基线漂移和噪声的前提。

电源检查： 连接符合规格的电源，确保接地良好，以防止静电干扰和电子元件损坏。

样品制备与比色皿选择：

空白溶液与待测样品： 必须使用相同的溶剂或背景溶液来配制空白（参比）和待测样品，以消除溶剂和比色皿本身对光的吸收影响。

比色皿配对： 对于精度要求高的定量测试，建议使用经过配对的比色皿。B1150C宽大的样品室可容纳5-100mm多种光程的比色皿，以适应不同浓度样品的测试需求，扩展了仪器的测试范围。使用时，需保持比色皿透光面的清洁，严禁用手直接触碰。

二、 开机与仪器初始化：

开机预热： 打开仪器电源。光源（如钨灯）和检测器（如硅光电二极管）需要一段时间达到稳定状态。通常预热时间为15-30分钟。B1150C具备自动暗电流校正和空白校正功能，但充分的预热是这些功能有效运行的基础，能显著提升光度准确度和重复性。

参数设置： 根据实验方案，通过仪器键盘设置所需的测量参数。

设定波长： 利用数字按键输入特定波长，B1150C支持320~1100nm的波长范围，并具备±0.5nm的波长准确度，能够满足从紫外边缘到近红外区多数化合物的测定需求。其自动波长校准和设定功能，减少了人为操作误差。

选择测量模式： 常见的模式包括透光率（T%）、吸光度（Abs）和浓度（Conc）。对于定量分析，需选择浓度模式并建立标准曲线。

三、 校准与测量：

校准是保证数据质量精度的核心，其目的是建立测量的基准线。

空白校正（100%T / 0Abs点）： 将盛有空白溶液的比色皿放入样品室，并关闭样品室盖。按下“自动调零"或“空白"键，仪器将自动以此为准，将透光率校正为100%，吸光度校正为0.000。这一步有效地扣除了溶剂和比色皿的背景吸收，是后续所有测量的参照点。

样品测量： 取出空白比色皿，放入盛有待测样品的比色皿（注意方向一致性）。关闭样品室盖后，仪器会直接显示该样品在设定波长下的吸光度或透光率值。

四、 定量分析（标准曲线法）：

对于浓度测定，标准曲线法是遵循国家标准的常用方法，具有较好的准确度。

配制标准系列： 准确配制一组已知不同浓度的标准品溶液。

建立曲线： 在仪器的定量测定功能中，依次测量各标准品的吸光度。仪器（如B1150C）会自动记录数据并绘制吸光度-浓度标准曲线，并可直观显示曲线图谱。系统通常支持线性或非线性拟合。

未知样品测定： 在建立好的标准曲线下，直接测量未知样品的吸光度，仪器即可自动计算并显示出其浓度值。如得利特B1150C的数据断电保持功能，使得建立的标准曲线和测试数据可以长期保存，方便后续调用，提升了工作效率。

五、日常维护与注意事项

规范的操作也包含对仪器的妥善维护。

样品处理： 防止样品溶液溅出，腐蚀样品室。挥发性或腐蚀性强的样品应快速测量并及时清理。

光源寿命： 尽管采用长寿命设计，但减少不必要的开关机频率有助于延长钨灯的使用时间。

清洁与存放： 定期清洁样品室和比色皿。仪器不使用时，应覆盖防尘布。

总结：

规范操作可见分光光度计是一个系统性的过程，从环境准备、开机预热、空白校正到样品测量和数据处理，每一步都直接影响最终结果的质量精度。选择一台光学结构稳定（如单光束光路与全息光栅）、性能可靠（如低杂散光、高光度准确度）、功能全面（支持光度、定量、扫描等多种模式）的仪器，是满足教学、科研、工业、环保等多行业应用需求，确保检测方法科学、数据可比对、可追溯，并符合相关国家标准对仪器性能要求的坚实基础。通过掌握正确的操作方法并配合性能稳定的仪器，操作者能够高效、准确地完成各类分析任务。